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Escherichia coli DH10Bac
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产品名称: Escherichia coli DH10Bac
商品货号: MP1448
基因型: F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ-rpsL nupG / pMON14272 / pMON7124。
基本信息: DH10Bac是昆虫杆状病毒Bac-to-Bac系统中常用的同源重组大肠杆菌菌株。该菌株含有杆状病毒穿梭载体(baculovirus shuttle vector) bMON14272(俗称bacmid,其含有一个转座反应必须的mini-attTn7重组位点)和一个辅助质粒pMON7124(用于表达转座所需的转座蛋白)。DH10Bac主要用作pFastBac等类似载体转化的宿主菌株。当pFastBac重组质粒转化进入DH10Bac细胞后,pFastBac载体上的mini-Tn7位点和DH10Bac宿主菌中bacmid上的mini-attTn7位点之间发生转座(transposition),产生重组的bacmid。重组的bacmid在转染昆虫细胞后可产生含有重组子的杆状病毒,后者进一步感染昆虫细胞后即可启动外源重组蛋白的表达。 DH10Bac宿主包含的bacmid bMON14272含小型F复制子,卡那霉素抗性基因,mini-attTn7位点和lacZα互补因子(可通过蓝白斑筛选);辅助质粒pMON7124包含四环素抗性和tnsABCD区域,该区域表达转座反应所需的转座蛋白。携带T7转座原件(Tn7 element)的供体质粒pFastBac (donor pFastBac plasmid)带有庆大霉素抗性基因,杆状病毒多角体启动子,多克隆位点区域和SV40的多腺苷酸化信号。
菌株简介: DH10Bac菌株具有卡那霉素抗性和四环素抗性,pFastBac质粒具有庆大霉素(Gentimicin)抗性和氨苄青霉素抗性。重组后的克隆用蓝白斑进行筛选,重组成功的克隆在含有卡那霉素和四环素抗性的IPTG/X-Gal LB平板上呈现为白色菌落。 本菌株可以使用常规的LB培养基或SOC培养基进行培养。