| 产品名称 |
HSF-SV40T |
| 商品货号 |
MZ-2226 |
| 中文名称 |
人真皮成纤维细胞（SV40转染）（包皮，皮肤，眼睑皮都有） |
| 组织来源 |
皮肤 |
| 形态特征 |
典型的成纤维细胞形态，长条状或梭形 |
| 生长特性 |
贴壁生长 |
| 特征特性 |
国际通用细胞系人真皮成纤维细胞HSF由美国atcc建系，但由于国内使用过于频繁因此出现了老化，目前国内已经没有现存状态优质的细胞系种子了，本公司也是发现了这个现象，因此国内建系永生化了一份人的 皮肤成纤维细胞，采用SV40T慢病毒转染建立。来源有人眼睑，手部，臀部，包皮等多份来源 |
| 细胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件 |
人原代皮肤成纤维细胞专用培养基 气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃ |
| 传代方法 |
首次传代建议1：2传代 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿 |
| 细胞冻存步骤 |
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 复苏细胞步骤 |
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞传代步骤 |
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 冻存条件 |
无血清冻存液，液氮储存 |
