永生化大鼠少突胶质前体细胞

永生化大鼠少突胶质前体细胞采用酶解法和基因转染制备而来

HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

永生化大鼠少突胶质前体细胞完全培养基

少突胶质前体细胞（OPCs）是中枢神经系统中形成髓鞘的主要细胞的前体，它们分化为少突胶质细胞，负责包绕轴突形成绝缘的髓鞘结构。少突胶质前体细胞在发育中的中枢神经系统中广泛迁移，并利用血管作为物理支架。它们与血管的关联对其迁移至关重要。少突胶质细胞的主要功能是在中枢神经系统中包绕轴突、形成绝缘的髓鞘结构，这有助于协助生物电信号的跳跃式高效传递，并维持和保护神经元的正常功能。其异常不仅会导致中枢神经系统脱髓鞘病变，还会引起神经元损伤或精神类疾病，甚至可以引发脑肿瘤。此外，有研究表明，内皮细胞在脑发育过程中通过STING信号调节少突胶质前体细胞的应答，进而影响少突胶质细胞的生成和髓鞘形成。这一发现揭示了血管系统在调节少突胶质细胞发生中的重要作用机制。

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。