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人牙周膜成纤维细胞
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MZ-M0036

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产品名称: 人牙周膜成纤维细胞
商品货号: MZ-M0036
组织来源: 人牙周膜组织,原代冻存
规格: 5×105cells/T25培养瓶
生长特性: 贴壁
细胞形态: 成纤维细胞样
培养基: DMEM高糖培养基,含FBS、成纤维细胞生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
细胞污染: HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
细胞描述: 牙周膜是位于牙骨质和下颌骨的齿槽骨之间的结缔组织。牙周膜对牙周组织的维持和再生起着不可缺的作用。成纤维细胞被认为是维持组织的关键细胞,它们可以是多功能的,或由功能不同的异源细胞群组成。尽管在形态上与牙龈纤维原细胞很相似,牙周膜纤维原细胞在保持组织完整性上起着重要的功能性作用。人们认为牙周膜成纤维细胞产生造骨细胞样的细胞外基质蛋白,并且比牙龈成纤维细胞产生更高的碱性磷酸酶活性。在牙周疾病中,牙周膜纤维原细胞积极参与免疫作用和炎症。
细胞传代步骤: 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞复苏步骤: 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
细胞冻存步骤: 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。